液氮罐凍存細胞的原因就在于內(nèi)膽中液氮提供深低溫,可以說沒有液氮,容器對細胞而言沒有任何作用。
液氮的溫度-196℃,沸點-196.56℃,通過吸熱氣化來降溫,它的揮發(fā)不可逆,所以,即便設(shè)計有真空結(jié)構(gòu)的液氮容器,一樣阻止不了液氮揮發(fā),只能減緩揮發(fā)進程。液氮放入其中是一個緩慢減少直至完全揮發(fā)完的過程,即便不開蓋,于是就有了靜態(tài)保存時間,一個裝入液氮后不打開不使用的時間,但對細胞來說這個時間不等于安全時間。
細胞需要的完全被液氮浸泡,不管液氮如何揮發(fā),要細胞安全就得保證液氮能完全覆蓋住細胞,一直覆蓋。
因此,液氮罐另外有一個補液臨界范圍:保存有樣本時以樣本高度參照為參照,一旦液氮覆蓋不住對細胞而言就是不夠了。
影響有兩點:
1.損傷細胞活性
2.造成細胞死亡
不管結(jié)果是哪種這管細胞一定是不能再使用,無法繼續(xù)研究進行,因此可以約等于同一個影響。
不同于僅液氮的儲存,細胞的保存是裝凍存罐,放入凍存盒,然后是凍存架,架子有提竿和主體部分,主體部分靠下但高度不低,如果液氮量逐漸少到蓋不住凍存架頂部的細胞,那此位置溫度會快速升高,細胞活性很可能受損傷,繼續(xù)不管必然死亡。
如果液氮仍得不到補充,或等液氮完全消耗完再補充,液氮罐溫度升至常溫,就不止是頂部細胞受了,而是全部細胞都無法使用。